放射免疫計數(shù)器是一種用于測量放射性同位素標記生物分子濃度的精密儀器,廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)、藥物研發(fā)及環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。其核心原理基于放射性同位素的衰變特性,通過探測器捕捉標記分子釋放的γ射線或其他粒子,結(jié)合計數(shù)系統(tǒng)與數(shù)據(jù)處理軟件,實現(xiàn)目標物質(zhì)的定量分析。
儀器主要由探測器、計數(shù)器、樣品艙及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。探測器通常采用碘化鈉晶體或光電倍增管,將γ射線轉(zhuǎn)化為電信號;計數(shù)器負責記錄單位時間內(nèi)的衰變事件數(shù)量;樣品艙確保待測樣本與探測器精準對接。操作時,需先將待測樣本(如血清、尿液)標記上放射性同位素(如¹²?I、³H),隨后樣本中的抗原或抗體與標記物結(jié)合,形成復(fù)合物。探測器捕捉復(fù)合物釋放的輻射信號,計數(shù)器統(tǒng)計信號頻率,最終通過標準曲線法或比較法,將計數(shù)率轉(zhuǎn)化為目標分子濃度。
一、環(huán)境與安全準備
檢查工作環(huán)境:
確保儀器放置在平穩(wěn)、堅固、通風良好的實驗臺上。
周圍留有足夠空間(尤其是散熱區(qū)域),避免陽光直射和強電磁干擾。
工作區(qū)域應(yīng)有明確的電離輻射警示標志。
個人防護:
操作人員必須穿戴實驗服、手套(建議使用一次性乳膠或丁腈手套)、口罩。
建議佩戴個人劑量計(如熱釋光劑量計TLD),監(jiān)測累積輻射劑量。
準備好輻射應(yīng)急處理工具,如鑷子、吸水紙、專用廢物容器等。
輻射安全檢查:
確認儀器的鉛屏蔽層完好無損,門蓋閉合嚴密。
檢查儀器周圍輻射水平(可使用便攜式輻射檢測儀),確保無異常泄漏。
二、儀器開機與自檢
開機:
連接電源,打開主電源開關(guān)。
啟動儀器和配套的計算機(如為電腦控制型)。
預(yù)熱:
按照說明書要求進行預(yù)熱,通常需要15-30分鐘。預(yù)熱可使探測器(通常為NaI(Tl)閃爍晶體)和電子線路達到穩(wěn)定工作狀態(tài),保證測量精度。
系統(tǒng)自檢(Power-On Self-Test):
儀器啟動后會自動進行硬件自檢,檢查探測器、高壓電源、計數(shù)電路等是否正常。
觀察顯示屏或軟件界面,確認無錯誤代碼或報警信息。
三、軟件與參數(shù)設(shè)置
啟動控制軟件:
打開配套的計數(shù)器控制與數(shù)據(jù)分析軟件。
創(chuàng)建或加載測量程序:
根據(jù)待測樣本類型(如TSH、Insulin等),選擇或創(chuàng)建相應(yīng)的測量方法(Method)。
設(shè)置關(guān)鍵參數(shù):
同位素選擇:如¹²?I(碘-125)或?¹Cr(鉻-51),儀器會自動優(yōu)化能量窗口。
測量時間:設(shè)定每個樣本的計數(shù)時間(如60秒、120秒),高活度樣本可縮短時間,低活度需延長。
樣品類型:區(qū)分標準品(Standard)、質(zhì)控品(QC)、未知樣本(Unknown)等。
樣品編號與位置:輸入或掃描樣品架編號,確保軟件與物理樣品位置對應(yīng)。
校準設(shè)置(如需要):
確認儀器的能量校準和效率校準是否在有效期內(nèi)。
如進行新項目或長時間未用,可能需要使用標準源進行重新校準(由專業(yè)人員操作)。
四、樣品準備與裝載
樣品檢查:
確認待測樣本(通常為試管或微孔板中的液體)已按放射免疫分析(RIA)流程完成反應(yīng)和分離(如沉淀、離心)。
檢查試管是否完好、無泄漏、無破損,管壁清潔。
樣品架裝載:
將樣本試管按順序(通常為圓形或矩形排列)放入專用的樣品架中。
確保試管插入到位,避免傾斜或松動。
在軟件中輸入或確認樣品編號、類型等信息。
本底測量(可選但推薦):
放入一個空白管(僅含緩沖液或非放射性基質(zhì)),作為本底對照。
測量本底計數(shù)率,用于后續(xù)數(shù)據(jù)校正。
五、儀器性能驗證
質(zhì)控品測量:
在正式測量前,先運行高、低兩個水平的質(zhì)控品(QC)。
檢查測量結(jié)果是否在允許范圍內(nèi),驗證儀器的精密度和準確度。
標準曲線驗證(如適用):
如果當天需要建立標準曲線,確保標準品已正確放置并測量。
六、其他準備
記錄本:準備好實驗記錄本,用于記錄測量時間、樣品信息、儀器狀態(tài)等。
清潔用品:準備好無絨布、70%酒精等,用于清潔儀器表面(切勿讓液體進入儀器內(nèi)部)。
放射性廢物容器:準備好專用的、有屏蔽的放射性廢物桶,用于丟棄使用過的試管、吸頭、手套等。
